2011年前，猪伪狂犬病在我国得到良好控制，曾经是我国最有希望净化的一个猪病。然而，2011年11月，我国华北地区首先爆发变异株伪狂犬病，致病力明显增强，随后快速向全国扩散。经研究其主要原因是伪狂犬病毒发生变异，毒力增强，原有疫苗保护率下降。此后，采用大幅提高疫苗效价、“活+灭”联合免疫、增加免疫频次等方式，猪场猪伪狂犬病的临床防控得到明显提升，但多数猪场gE抗体阳性率仍然居高不下，中大猪gE抗体转阳，继发呼吸道疾病增加，猪场伪狂犬病的净化难度进而加大。如何更好地做好猪伪狂犬病的控制和净化？有没有更好的疫苗工具？能否降低免疫频次？能否净化更容易？阴性场能否保持长期的净化状态？这些都是猪场非常关心的话题。今天给大家隆重介绍一个猪场伪狂犬控制与净化的利器——全球首款基因Ⅱ型变异株猪伪狂犬病活疫苗（TP株）。
01 产品研发背景
1.1 伪狂犬病毒发生变异
2011年下半年，我国爆发新一轮猪伪狂犬病疫情，众多伪狂犬疫苗免疫过的猪场也未能幸免。初次感染场，特别是野毒抗体阴性场，损失惨重。很多猪场生长育肥猪、后备母猪首先发病，随后出现母猪大量流产、产死胎、产弱仔，以及哺乳仔猪、保育猪、生长育肥猪均有可能出现腹泻、呼吸道症状、神经症状和死亡；很多即使免疫得很好的猪场，虽没有表现出典型的临床症状，但gE抗体也快速转阳，中大猪呼吸道疾病增多。
伪狂犬毒株分子水平发生变异。通过基因扩增测序，新分离的PRV出现基因变异，主要在TK，gB，gC和gE发生多个碱基的标志性突变和连续性缺失。通过对gC基因的进化树分析发现，欧美分离株可归为一个大分支，被归类为基因I型；而中国分离株与韩国分离株则可归为另一个大分支，属于G2型。G2型又可以分为两个小分支，经典毒株和变异毒株，时间分界点为2012年。
变异株毒力明显增强。经典毒株（S株）对小鼠的LD50为107.0TCID50，变异株（HeN1）为102.4TCID50。变异毒株对猪的致病性也明显增强，可造成各年龄阶段的猪感染发病，中大猪也可表现为神经症状和发病死亡。经典毒株疫苗免疫后血清对流行毒株的中和抗体明显偏低。Bartha-K61疫苗免疫后猪的血清中和抗体，对经典株的效价在20-40倍，而对变异株（HeN1）的中和效价只有10-15倍。
据2019年田克恭研究员的线上课件资料，经典毒株商品化疫苗只能提供约60%的临床保护（2/5发病），部分免疫组甚至有20%的猪只死亡（1/5死亡）。
总之，2011年以来猪伪狂犬病毒在分子水平上、致病力、血清交叉中和能力、疫苗攻毒保护等方面都发生了明显的变化。生产上急需研制出一款同源性更高、对临床变异毒株中和抗体效价更高、临床保护更好，且能高效阻断伪狂犬野毒传播的伪狂犬疫苗。
02 变异5基因缺失猪伪狂犬病活疫苗(TP株)的研制
华派生物技术（集团）股份有限公司和中国农科院哈尔滨兽医研究所猪病综合防控创新团队联合开展了研制变异株伪狂犬活疫苗工作，华派生物重点做生产工艺、临床应用研究。
2.1 毒株培育
以哈尔滨兽医研究所猪病综合防控创新团队首席科学家为首的研究团队将2012年分离纯化的PRV HeN1株病毒通过低温致弱获得了包括gI、gE、Us9、Us2及部分反向重复序列的毒株，该毒株是目前已有疫苗株中Us区缺失片段最大的毒株。同样缺失Us区的gI、gE、Us9、Us2四基因，HeN1株F145代病毒接种组4只羊全部死亡，而Bartha K61株疫苗毒接种组4只羊全部存活，说明变异株毒力增强，仅缺失Us区的gE等基因对绵羊等易感动物仍具有较强致病力。进一步通过药物加压筛选获得了最终包括TK、gI、gE、Us9、Us2及部分反向重复序列的5基因缺失疫苗株（TP株）。
2.2 安全性评价
绵羊安全性评价：5只绵羊，肌注PRV(TP株)疫苗107.0TCID50/只，观察14天。结果，5只绵羊全部健活，高剂量免疫仍对敏感动物无毒副反应，说明猪伪狂犬病活疫苗（TP株）是目前最安全的伪狂犬疫苗之一。PRV（TP株）疫苗10倍剂量（107.0TCID50/头）免疫后，免疫组猪只全部健活，且无一过性发热。剖检后在任何免疫猪只的组织内均未分离到病毒，也检测不到核酸。PRV（TP株）疫苗免疫任何日龄猪只均安全（包括种公猪、妊娠母猪等），不存在水平和垂直传播风险，不散毒不返强，理论上疫苗毒与其它病毒重组的可能性极低。
2.3 免疫效力研究
仔猪免疫后14天，PRV-HeN1株攻毒（106.0TCID50），观察到第14天。对照组死亡率100%，免疫组致死保护率100%，发病保护率100%，且仍有3/5的猪只gE抗体维持阴性，其免疫保护力表现优异。免疫攻毒后TP株排毒比例低，排毒量小，且更能阻断水平传播。对照组5/5死亡，TP株免疫组5/5保护，Bartha-K61株免疫组4/5保护。因此，PRV(TP株)疫苗免疫仔猪对PRV变异株的保护效果优于Bartha-K61疫苗，也是目前保护效果最好的猪伪狂犬病疫苗。
03 伪净泰产品特点
华派生物是中国动物疫苗先进工艺领军企业，建有核酸疫苗和亚单位疫苗国家地方联合工程实验室，获得了国家企业技术中心资质认定，其兽用生物制品质量评价中心也获得CNAS认可资质和GCP资质。华派生物对伪狂犬活疫苗的生产工艺进行了优化提升，并开展了大量的临床应用评价工作。2024年7月正式推出变异株5基因缺失猪伪狂犬病活疫苗（TP株）——伪净泰！
伪净泰具有以下特点和优势：
3.1 变异毒株
TK/gE/gI/Us9/Us2五基因缺失，保留完整免疫原性。全球首个基因Ⅱ型伪狂犬变异毒株活疫苗。亲本毒株HeN1株被美国农业部APHIS、ARS和英国APHA引进研究。
3.2 纯净安全
疫苗纯净，无外源病毒和支原体污染。高度敏感的绵羊肌注107.0TCID50/只，临床无异常表现，全部健活；10倍剂量免疫猪均安全，无水平传播和垂直传播；对任何日龄的猪免疫均安全。
3.3 超高效价
疫苗抗原含量≥106.3TCID50/头份，远高于规程标准。最小免疫剂量104.0TCID50/mL/头，即可5/5攻毒保护；为高效阻断伪狂犬的传播，华派内控标准定为≥106.3TCID50/头。
3.4 全面保护
免疫后7天起效，紧急免疫可迅速控制伪狂犬病疫情，减少经济损失；保护期长达6个月；对我国流行变异株强毒（基因Ⅱ型）和经典株强毒（基因Ⅰ型）均可提供完全保护，高效阻断野毒传播，保护效果显著优于经典株。
3.5 增效减负
无需“活+灭”免疫，免疫频次少，育肥猪可一针出栏，性价比更高。
3.6 净化首选
TK/gE/gI/Us9/Us2五基因缺失，保留完整免疫原性。全球首个基因Ⅱ型伪狂犬变异毒株活疫苗。亲本毒株HeN1株被美国农业部APHIS、ARS和英国APHA引进研究。
04 伪净泰应用场景
2021年5月1日修订施行的《中华人民共和国动物防疫法》，明确将“净化消灭”纳入动物防疫的方针和要求。2021年10月28号，农业农村部发布了《关于推进动物疫病净化工作的意见》，提出了力争在下一个5年内国内80％的核心育种场要实现伪狂犬病等一系列垂直传染性动物疫病的净化。《农业农村部关于印发新一轮全国畜禽遗传改良计划的通知》（农种发〔2021〕2号）和《全国畜禽遗传改良计划实施管理办法》及配套办法的通知（畜种办[2021]1号）均明确要求种猪场猪伪狂犬病要达到免疫无疫（猪伪狂犬病病毒gE抗体检测阴性）的健康标准。此外，开展猪伪狂犬病的净化也是猪场增效降本，提升养殖效益的迫切需求，据报道伪狂犬野毒阳性场的PSY一般比伪狂犬野毒阴性场PSY低0.5-1头。
伪净泰是首个基因Ⅱ型变异毒株5基因缺失猪伪狂犬活疫苗，在猪场伪狂犬病的预防控制和净化方面有明显的优势，是猪场伪狂犬病防控净化的理想工具。同时华派生物还提供综合的技术支持和猪场个性化控制和净化方案，欢迎有需求的猪场电话咨询华派生物技术服务部（服务热线：028-27290977）。
